Posted on

Du Måste Bli Uppenbar Om Dina PCr Gels Felsökningsproblem

Stoppa krascher och fel med Reimage reparationsguiden. Klicka här för att ladda ner.

Du kan komma igenom en felkod som anger varför pcr-geler kommer att fixas. Det kanske finns flera sätt att lösa detta fel, och vi kommer att ta itu med dem inom kort.Inga band och hård front.Provet sjunker inte till hela botten av brunnen.Provet dyker upp ur brunnen.Banden kunde spridas vertikalt.Det finns för ett antal grupper.Gelen flyter onormalt långsamt.Gelen fungerar faktiskt onormalt snabbt.Proteinband för nära varandra (inte helt lösta)

Möjliga orsaker Rekommendationer Förbereder pastan Tjock gel
  • När du häller en agarosgel på utsidan, håll geltjockleken mot ca 3-4 mm. Under elektrofores kan gel med en tjocklek på mer än 5 mm bildas i dessa diffusionsremsor.
Fungerade inte bra
  • Gör ordentligt igenom gelkammen innan du häller all gelen.
  • För att förhindra att det grundläggande av provet läcker genom frysning och smetar av erfarenhetsremsorna, tryck inte ner den lätta borsten till botten som är involverad med den horisontella gelen.
  • Undvik att överfylla våra gelskålar eftersom detta potentiellt kan leda till blockering av vattenhålen.
  • Vänta på de bucklor som skulle bildas och ta bort pilgrimsmusslan tidigare.
  • När gelén har stelnat tar du försiktigt bort kammen och var försiktig så att du inte skadar typen av avtryck.
ogiltig typ
  • För elektrofores av positiva enkelsträngade nukleinsyror (t.ex. RNA), förbered en riktig slutlig denaturerande gel för effektiv uppdelning. Å andra sidan, håll undan från denaturerande geler med dubbelsträngade DNA-prover.
Provberedning Provet är utan tvekan överbelastat
  • Använd tillsatt än riktigt stora mängder produkter för fyllningselektrofores; Normalt rekommenderas 0,1 om du vill ha 0,2 μg per mm behandlingsbrunnsbredd. Ränder, deformerade och/eller möjligen U-formade linjer och ränder som ser ut att sätta ihop är ett vanligt kännetecken förknippat med överfulla geler.
Trasigt prov
  • Se till att exakta reagenser är av molekylärbiologiska kvalitetsnivåer och är vanligtvis nukleasfria i forskningslaboratorieutrustning. Följ bra laboratoriesätt (t.ex. bära skyddshandskar, skydda mot nukleaskontamination, arbeta i specificerade områden, etc.) varje gång du hanterar syror, nukleinsyror, vanligtvis när du arbetar med RNA.
Prov på högsaltbuffertar
  • Se till att saltkoncentrationen genom fyllningsbufferten är kompatibel genom att arbeta med den valda gelen. Förtunna repowering barriären vid behov.
  • Om en viss nukleinsyrapool redan befinner sig under en obstruktion med hög salthalt, späd typiskt provet till ett normalt nukleasfritt tillstånd innan du lägger till laddningsbuffert. Om det är värdefullt, rena eller fäll ut nukleinsyran ytterligare suspendera provet i nukleasfritt havsvatten för att avlägsna mer salt.
Högproteinprov
  • Proteiner som finns i provet kan mycket väl störa användningen av liten provfluiditet i gelén. Ta bort dessa proteiner genom att rena analysen, eller alternativt dissociera/denaturera proteinet genom att förbereda provet i SDS-laddningsfärgen och värma upp före buffring.
Inkompatibelt lasthinder
  • För elektroforetiskt relaterade enkelsträngade nukleinsyror, använd en färgdenaturerande bil och värm sedan upp provet för att förhindra överskott av duplexbildning.
  • För dubbelsträngad DNA-elektrofores är färgladdningen en stor tillräcklig anledning till denaturering och den saknar uppvärmning i experimentet när du behöver bevara duplexstrukturen.
Gellauf Bubblor på exempel på internet
  • Se till att luftfickor som dyker upp i brunnen under provtagning på internet inte fastnar, förblir tejpförvrängning.
Väl skadad vid uppstart
  • Undvik att sticka hål i pipettspetsens vattenhål när provet laddas.
Vattenprovet innehåller rester fulla av akrylamid och/eller urea
  • Om du använder polyakrylamidgeler, skölj av eventuell akrylamid (och urea om gelerna kan vara denaturerad) från provbrunnen för att lyckas ladda provet.
Mycket låg hög, även känd som spänning
  • Applicera vår rekommenderade spänning för det specifika nukleinsyrastorleksintervallet och arbetsskölden som används. Mycket låg eller hög existerande kan Detta kan leda till suboptimal upplösning vid separering av nukleinsyror.
Mycket kort eller lång riktad tid
  • En fungerande gel som håller tillräckligt länge på grund av att garantiremmarna lossnar. Men mycket lång drift kan leda till återgång till överhettning, förvrängda prover och suddiga känslor.
Inkompatibel körningsström
  • Se till att de flesta pastor och expressbuffertar är kompatibla och därför förberedda på rätt sätt.
  • Använd högbuffrad användbar elektrofores för mer än 2 gånger.
Exempelrendering Grupppengardistribution
  • Undvik garageområde eller bättre tid mellan färdigställandet tillsammans med elektrofores och visualisering av all gel; mindre molekylstorleksband kan förbättras som diffusa, desto bättre är det mesta av nukleinsyrafärgningen dokumenterad i generellt gel.
Flytta vägar
  • Använd korrekt hudgelspänning, provisionsgrad och resultat i tid. För att separera artister med liknande molekylär kapacitet. Migrerande band uppträder ofta som en luddig, tjock och lätt krage. Kamera
    • För att få
    oskärpa Se till att en kamera är i fokus när snö är synlig genom linsen för att se på skärmen.

Varför råkar vara att min gelelektrofores strimlar?

1. Dålig gel: Om vätskan absolut inte hälls på rätt sätt kommer den definitivt inte att polymerisera eller härda jämnt, vilket gör att specifika molekyler smetar ut. Om vattenbrunnarna är överfyllda, eller om proverna alltid har varit dåligt utspädda, kan en upphopad melodi smeta ut över denna gel.

Åtgärda vanliga PC-fel och skydda din dator från skador. Ladda ner här.

Troubleshooting Pcr Gels
Risoluzione Dei Problemi Con I Gel Pcr
Depannage Des Gels Pcr
Ustranenie Nepoladok S Gelyami Dlya Pcr
Pcr 젤 문제 해결
Pcr Gels Oplossen
Solucao De Problemas De Geis Pcr
Fehlerbehebung Bei Pcr Gelen
Solucion De Problemas De Geles Pcr
Rozwiazywanie Problemow Z Zelami Pcr