Posted on

Musisz Całkowicie Uwolnić Się Od Problemów Z Rozwiązywaniem Problemów Z żelami PCr

Zatrzymaj awarie i błędy za pomocą kreatora naprawy Reimage. Kliknij tutaj, aby pobrać.

Możesz pojawić się kod błędu wskazujący, że żele pcr zostaną naprawione. Pojawiło się kilka sposobów rozwiązania tego bólu głowy, z którymi wkrótce się zajmiemy.Brak wstążek i zimowy przód.Próbka nie opada na to dno studni.Próbka wychodzi ze studni.Zdarza się, że wstążki rozkładają się pionowo.Jest zbyt duża liczba grup.Żel płynie nienormalnie wolno.Żel będzie działał nienormalnie szybko.Pasma białka zbyt blisko (nie w pełni rozwiązane)

Możliwe przyczyny Zalecenia Przygotowanie fundamentu Gęsty żel
  • Podczas wylewania żelu agarozowego na boki należy zachować grubość żelu około 3-4 mm. Podczas elektroforezy w każdym pasku dyfuzyjnym mogą tworzyć się pasty o grubości większej w porównaniu z liczbą 5 mm.
Nie działa dobrze
  • Dokładnie odśwież i wyczyść grzebień żelowy przed wylaniem części żelu.
  • Aby zapobiec przeciekaniu próbki po zamrożeniu i rozmazaniu pasków kontrolnych, nie należy dociskać czystego do samego dna wychodzącego z całego poziomego żelu.
  • Unikaj przepełniania naszych misek żelu, ponieważ może to prowadzić do zablokowania otworów.
  • Poczekaj na uformowanie się wgnieceń i usuń przegrzebek z wyprzedzeniem.
  • Po stwardnieniu żelu ostrożnie zdejmij grzebień i uważaj, aby nie uszkodzić zwykle wycisków.
nieprawidłowy typ
  • Do elektroforezy łańcuchowych jednoniciowych kwasów nukleinowych (np. RNA), przygotować na końcowy żel denaturujący w celu skutecznego rozbicia. Z drugiej strony, powstrzymaj się od żeli denaturujących z dwuniciowymi próbkami DNA.
Przygotowanie próbki Próbka niewątpliwie przeładowana
  • Używaj coraz większych ilości szalek do elektroforezy wypełniającej; Zazwyczaj zaleca się od 0,1 do 0,2 μg na mm szerokości dołka wypełniającego kwasem hialuronowym. Paski, niekształtne i/lub ewentualnie rzęsy w kształcie litery U oraz paski, które wydają się zagęszczać, są częstą cechą związaną z przepełnionymi żelami.
Uszkodzona próbka
  • Upewnij się, że odczynniki są najwyższej jakości w biologii molekularnej i zazwyczaj nie zawierają nukleaz w sprzęcie laboratoryjnym. Postępuj zgodnie z dobrymi czynnościami laboratoryjnymi (np. noszenie rękawic ochronnych, ochrona oryginalnie przed zanieczyszczeniem nukleazą, praca w określonych obszarach itp.) podczas pracy z kwasami, kwasami nukleinowymi, a tym bardziej podczas pracy z RNA.
Próbki buforów o wysokiej zawartości soli
  • Upewnij się, że stężenie soli działające w buforze wypełniającym jest zgodne w wybranym żelu. W razie potrzeby rozcieńczyć narastającą barierę.
  • Jeśli rzeczywista pula kwasów nukleinowych już przeszła przez przeszkodę o wysokim zasoleniu, przed dodaniem buforu ładującego rozcieńczyć każdą próbkę do normalnego stanu wolnego od nukleaz. W razie potrzeby dodatkowo oczyść lub wytrąć kwas nukleinowy, aby ponownie zawiesić próbkę w gorącej wodzie wolnej od nukleaz, aby usunąć więcej soli.
Próbka wysokobiałkowa
  • Białka obecne w próbce prawdopodobnie będą zakłócać wykorzystanie płynności wzoru w żelu. Usuń białko, oczyszczając test, a także zdysocjuj/zdenaturuj białko, przygotowując próbkę w kolorze obciążenia SDS i ogrzewając przed strumieniowaniem.
Niezgodne obciążenie
  • W przypadku elektroforetycznie powiązanych jednoniciowych kwasów nukleinowych należy użyć sportowo-użytkowego nośnika z denaturacją barwnika, a następnie podgrzać próbkę, aby zapobiec tworzeniu się ujemnego dupleksu.
  • W przypadku elektroforezy dwuniciowego DNA ładunek barwnika jest wystarczającym powodem denaturacji i utraty ogrzewania w eksperymencie ze względu na zachowanie struktury dupleksu.
Gellauf Bąbelki na początku próbki
  • Upewnij się, że kieszenie powietrzne, które pojawiają się w studni przechodzącej przez próbkowanie Internetu nie są uwięzione, unikaj zniekształceń taśmy.
Dobrze uszkodzony podczas rozruchu
  • Unikaj przekłuwania studzienek wodnych końcówki pipety podczas ładowania próbki.
Próbka wody zawiera pozostałości sformułowane z akryloamidem i/lub mocznikiem
  • Jeśli pracujesz z żelami poliakryloamidowymi, wypłucz pozostały akrylamid (i mocznik, jeśli żele można zdenaturować) z zagłębienia próbki, aby załadować próbkę.
Bardzo niski wysoki, znany również w postaci napięcia
  • Zastosuj nowe zalecane napięcie dla żądanego zakresu wielkości kwasu nukleinowego i stosowanej przeszkody roboczej. Może to prowadzić do suboptymalnej oceny podczas oddzielania kwasów nukleinowych.
Bardzo krótki lub długi czas opanowania
  • Żel, który utrzymuje się wystarczająco długo, zaprojektowany, aby poluzować się paski gwarancyjne. Jednak bardzo długa praca może prowadzić do przegrzania, zniekształcenia próbek i nieostrych zakłóceń.
Niezgodny strumień wykonania
  • Upewnij się, że większość buforów żelowych i ekspresowych jest kompatybilna z odpowiednim przygotowaniem.
  • Używaj elektroforezy o wysokim buforze przez ponad 2 godziny.
Przykładowe renderowanie Grupowa dystrybucja pieniędzy
  • Unikaj przechowywania pojemnika lub lepszego czasu między zakończeniem elektroforezy a wizualizacją, z którego żel; mniejsze prążki wielkości cząsteczek mogą przejawiać się jako rozproszone, tym lepiej udokumentowane jest barwienie kwasu nukleinowego w moim żelu.
Ruchome ulice
  • Używaj właściwego napięcia żelowania, stawki prowizji i czasu, aby oddzielić artystów o podobnych masach cząsteczkowych. Wstęgi wędrowne często pojawiają się jako praktycznie każdy rozmyty, gruby i lekki kołnierz. Aparat
    • Po prostu być
    rozmycie Upewnij się, że kamera jest ustawiona na ostrość, gdy śnieg jest widoczny przez obiektyw przeznaczony do oglądania na ekranie.

Dlaczego tak naprawdę jest smuga elektroforezy żelowej?

1. Źle pomyślane o żelu: Jeśli płyn nie zostanie nalany prawidłowo, na pewno będzie się równomiernie polimeryzował lub twardnieł, powodując rozmazywanie cząsteczek. Jeśli kanały wodne są przepełnione lub jeśli jakaś próbka była zawsze słabo rozcieńczona, dalsza melodia może rozmazać się na widocznym żelu.

Napraw typowe błędy komputera i chroń komputer przed uszkodzeniem. Pobierz tutaj.

Troubleshooting Pcr Gels
Felsokning Av Pcr Geler
Risoluzione Dei Problemi Con I Gel Pcr
Depannage Des Gels Pcr
Ustranenie Nepoladok S Gelyami Dlya Pcr
Pcr 젤 문제 해결
Pcr Gels Oplossen
Solucao De Problemas De Geis Pcr
Fehlerbehebung Bei Pcr Gelen
Solucion De Problemas De Geles Pcr