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Debe Deshacerse De Los Problemas De Solución De Problemas De PCr Gels

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Es posible que se encuentre con un nuevo código de error que indica que se repararán los ungüentos pcr. Hay solo algunas formas de resolver este problema, e incluso lo trataremos brevemente.Sin cintas y frente helado.La melodía no se hunde hasta el componente del pozo.La muestra sale al mercado del pozo.Las cintas se pasan verticalmente.Hay demasiados grupos.El líquido fluye anormalmente lento.El gel funciona poco común rápidamente.Bandas de proteínas demasiado juntas (no resueltas por completo)

Causas posibles Recomendaciones Preparación del gelatinizado Gel Espeso
  • Cuando vierta una agarosa horizontal gelatinizada, mantenga el espesor del gel en la región de 3-4 mm. Durante la electroforesis, se pueden formar geles completos con un espesor de más de mm técnicas en la tira de difusión.
No dio buenos resultados bien
  • Limpie a fondo y con frecuencia el peine de gel antes de verter el relleno de ácido hialurónico.
  • Para evitar que la parte inferior de la muestra se filtre por el frío intenso y las manchas de las piezas de muestra, no empuje el peine hacia el fondo de su gel horizontal.
  • Evite el sobrellenado de nuestros tazones de gel, ya que esto puede provocar el bloqueo de los pocillos.
  • Espere a que desaparezcan las abolladuras y retire la vieira de antemano.
  • Una vez que el gel se haya endurecido, retire con cuidado el peine y siempre tenga cuidado de no dañar sus impresiones.
tipo inválido
  • Para la electroforesis de ácidos grasos nucleicos monocatenarios unidos (p. ej., ARN), prepare un último gel desnaturalizante para lograr una separación eficaz. Por otro lado, evite las pastas desnaturalizantes con muestras de ADN de doble cadena.
Preparación de la muestra Muestra no cargada
  • Use más en comparación con lo que realmente grandes cantidades de muestras para llenar la electroforesis; Por lo general, se recomiendan de 0,1 a 0,2 μg por mm de ancho de gel. Las rayas, las rayas distorsionadas y/o posiblemente en forma de U, así como las rayas que parecen fusionarse, son a menudo una característica común asociada con los geles maduros.
Muestra rota
  • Asegúrese de que los reactivos sean de calidad biológica molecular y que, por lo general, no contengan nucleasas en los productos de laboratorio. Siga las buenas prácticas de laboratorio (por ejemplo, ponerse guantes protectores, protegerse del virus de la nucleasa, trabajar en áreas específicas, etc.) al momento de manipular ácidos, ácidos nucleicos, especialmente en el caso de trabajar con ARN.
Ejemplo de tampones con alto contenido de sal
  • Asegúrese de que la concentración de sal en este tampón de relleno sea compatible con el gel seleccionado actualmente. Adelgace los arrecifes de carga si es necesario.
  • Si nuestro propio conjunto de ácidos nucleicos ya se encuentra en una obstrucción funcional por alta salinidad, diluya la prueba a un estado libre de nucleasas normal mucho antes de agregar el tampón de carga. Si es necesario, limpie o precipite el ácido nucleico y resuspenda la muestra en agua libre de nucleasas para eliminar más sal.
Muestra alta en proteínas
  • Las proteínas presentes en la muestra pueden impedir el uso de la fluidez de la muestra en el gel. Elimine lo importante purificando el ensayo y/o disocie/desnaturalice la proteína encontrando la muestra en el color de importación SDS y calentándola antes de cargarla.
Escudo de carga incompatible
  • Para los ácidos nucleicos monocatenarios enlazados electroforéticamente, use un vehículo desnaturalizante de tinte y, después, caliente la muestra para evitar la formación de dúplex inadecuados.
  • Para la electroforesis de ADN de doble cadena, la carga del colorante es razón suficiente para la desnaturalización y la falta de calentamiento en el experimento para conservar la estructura dúplex.
Gellauf Burbujas al cargar la muestra
  • Asegúrese de que las burbujas de aire que aparecen en el pozo durante el muestreo por Internet no queden atrapadas, evite la distorsión del adhesivo.
Bien dañino en el arranque
  • Evite perforar los pocillos de la punta de la pipeta mientras carga la muestra.
La muestra de agua contiene residuos fabricados con acrilamida y/o urea
  • Si está consumiendo geles de poliacrilamida, enjuague bien cualquier resto de acrilamida (y urea si los geles generalmente se desnaturalizan) de la muestra para estresar la muestra.
Muy bajo alto, también conocido como tensión
  • Aplique el voltaje altamente recomendado para la placa nucleica específica creada por el rango de tamaño de azúcar y el tampón de trabajo usado. Lata de tensión muy baja o alta Esto puede conducir a una resolución subóptima en cualquier momento de separación de ácidos nucleicos.
Oportunidad controlada muy corta o larga
  • Una solución para correr que dura lo suficiente como para que estas correas de garantía se aflojen. Sin embargo, una operación terriblemente larga puede provocar muestras calientes, distorsionadas y sonidos borrosos.
Escudo de ejecución incompatible
  • Asegúrese de que la mayoría de los geles express buffers sean compatibles y refinados correctamente.
  • Utilice electroforesis práctica con alto contenido de búfer durante más de 2 horas.
Representación de muestra Distribución de dinero grupal
  • Evite el almacenamiento o puede ser mejor el tiempo entre la finalización relacionada con la electroforesis y la visualización del gel; pueden desarrollarse bandas de tamaño molecular corto siendo difusas, mejor se documenta la tinción de p nucleico en el líquido.
Fichas móviles
  • Use el gel, la tasa de comisión y el tiempo de entrega correctos para separar a los artistas con tamaños moleculares similares. Las cintas migratorias suelen aparecer como un collar lanoso, grueso y ligero. Cámara
    • Ser
    blur Asegúrese de que la cámara fotográfica esté enfocada cuando la escarcha siempre haya sido visible a través de la lente para monitorear en la pantalla.

¿Por qué mi electroforesis en gel individual presenta rayas?

1. Pastas mal preparadas: si el líquido no se prueba correctamente, definitivamente no se polimerizará ni se endurecerá de manera uniforme, lo que hará que las sustancias se corran. Si los pocillos se sobrellenan, o si la muestra siempre ha estado mal diluida, el exceso de líquido puede manchar el gel.

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